# NOM-112-SSA1-1994 Bienes y servicios. Determinación de bacterias coliformes. Técnica del número más probable. Fuente: https://platiica.economia.gob.mx/normalizacion/nom-112-ssa1-1994/ Estado informado por la fuente: Vigente Disponibilidad local: texto - > Enlace al último Informe de revisión: - Clave de la Norma: NOM-112-SSA1-1994 - Comité que desarrolló la Norma: Comité Consultivo Nacional de Normalización de Regulación y Fomento Sanitario - Dependencia(s): Comisión Federal para la Protección contra Riesgos Sanitarios - Estado de la Norma: Vigente - Fecha de entrada en vigor: 18/11/1995 - Fecha de publicación en el DOF: 19/10/1995 - Grado: No equivalente - Producto, servicio, proceso o sistema: Bacterias coliformes - Título de la Norma: Bienes y servicios. Determinación de bacterias coliformes. Técnica del número más probable. ## PDF enlazado por la ficha oficial Tipo de publicación: pdf Relación con la ficha: principal Fuente del documento: https://platiica.economia.gob.mx/wp-content/uploads/sites/2/PDF_Normas_Publicas/NOM-112-SSA1-1994.pdf Correspondencia de clave pendiente de revisión: este documento no se indexa como texto de esta norma. Recuperación pendiente o parcial; consultar el archivo y la fuente original. ## NORMA Oficial Mexicana NOM-112-SSA1-1994, Bienes y servicios. Determinación de bacterias coliformes. Técnica del número más probable. Tipo de publicación: norma Relación con la ficha: principal Fuente del documento: https://sidof.segob.gob.mx/notas/docFuente/4883436 Recuperación pendiente o parcial; consultar el archivo y la fuente original. [Documento con formato](/normas/nom-112-ssa1-1994/documentos/dof-4883436/) ## PROYECTO de Norma Oficial Mexicana NOM-112-SSA1-1994, Bienes y servicios. Determinación de bacterias coliformes. Técnica del número más probable. Tipo de publicación: proyecto Relación con la ficha: historial Fuente del documento: https://sidof.segob.gob.mx/notas/docFuente/4728925 [Documento con formato](/normas/nom-112-ssa1-1994/documentos/dof-4728925/) Texto derivado para búsqueda; consultar el documento con formato para tablas e imágenes. PROYECTO de Norma Oficial Mexicana NOM-112-SSA1-1994, Bienes y servicios. Determinación de bacterias coliformes. Técnica del número más probable.   Al margen un sello con el Escudo Nacional, que dice: Estados Unidos Mexicanos.- Secretaría de Salud.-Comité Consultivo Nacional de Normalización de Regulación y Fomento Sanitario.   MERCEDES JUAN LOPEZ, Presidente del Comité Consultivo Nacional de Normalización de Regulación y Fomento Sanitario, con fundamento en el artículo 39 de la Ley Orgánica de la Administración Pública Federal; 3 fracción XXII, 13, 194 fracción I , 197, 401 Bis, 401 Bis 1, 401 Bis 2 de la Ley General de Salud; 3 fracción XI, 38 fracción II, 40 fracción I, VI, VIII, XI, XIII; 41, 43, 44, 45, 47, 50, 53 de la Ley Federal sobre Metrología y Normalización y los aplicables del Reglamento de la Ley General de Salud en Materia de Control Sanitario de Actividades, Establecimientos, Productos y Servicios; y 13 fracción I del Reglamento Interior de la Secretaría de Salud me permito ordenar la publicación en el   Diario Oficial de la Federación del proyecto de Norma Oficial Mexicana NOM-112-SSA1-1994, Bienes y Servicios. Determinación de Bacterias Coliformes. Técnica del Número más Probable El presente proyecto de Norma Oficial Mexicana se publica a efecto de que los interesados dentro de los siguientes 90 días naturales, contados a partir de la fecha de su publicación presenten sus comentarios ante el Comité Consultivo Nacional de Normalización de Regulación y Fomento Sanitario, sito en Lieja No. 7, 1er. piso, colonia Juárez, código postal 06696, México, D.F. Durante el plazo mencionado, los análisis que sirvieron de base para la elaboración del proyecto de Norma estarán a disposición del público para su consulta en el domicilio del Comité. México, Distrito Federal, a 26 de mayo de 1994. PREFACIO En la elaboración de la presente Norma participaron los siguientes organismos e instituciones: SECRETARIA DE SALUD Dirección General de Control Sanitario de Bienes y Servicios Laboratorio Nacional de Salud Pública SECRETARIA DE PESCA Instituto Nacional de la Pesca SECRETARIA DE AGRICULTURA Y RECURSOS HIDRAULICOS Comisión Nacional del Agua INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL Escuela Nacional de Ciencias Biológicas INDUSTRIAS VINICOLAS PEDRO DOMECQ, S.A. DE C.V. JUGOS DEL VALLE, S.A. DE C.V. LECHE INDUSTRIALIZADA CONASUPO, S.A. DE C.V., LICONSA SIGMA ALIMENTOS, S.A. DE C.V. LABORATORIO FERMI, S.A. LABORATORIO ICCABI, S.A. DE C.V. SOCIEDAD MEXICANA DE NORMALIZACION Y CERTIFICACION, S.C., NORMEX   INDICE 0 INTRODUCCION 1 OBJETIVO Y CAMPO DE APLICACION 2 FUNDAMENTO 3 REFERENCIAS 4 DEFINICIONES 5 SIMBOLOS Y ABREVIATURAS 6 REACTIVOS Y MATERIALES 7 APARATOS E INSTRUMENTOS 8 PREPARACION DE LA MUESTRA 9 PROCEDIMIENTO 10 EXPRESION DE RESULTADOS 11 INFORME DE LA PRUEBA 12 OBSERVANCIA DE LA NORMA 13 CONCORDANCIA CON NORMAS INTERNACIONALES 14 BIBLIOGRAFIA O INTRODUCCION Las bacterias coliformes son un grupo heterogéneo compuesto por 4-10 o más subgrupos. Existe poca evidencia que indique que estas bacterias pertenezcan a un solo género taxonómico. La falta de certeza en cuanto a su filiación taxonómica y la imprecisa correlación entre los métodos recomendados para la detección de coliformes han presentado problemas. El primero, aunque   Escherichia coli es aceptada como bacteria coliforme, la especie contiene variantes que no producen gas de la lactosa o lo hacen después de 48 horas, por lo que no se les identifica por medio de esta técnica. Segundo, la capacidad de fermentar la lactosa está frecuentemente asociada a genes localizados en plásmidos. Estos determinantes extracromosomales son fácilmente transferidos entre otras bacterias gram negativas no relacionadas a las coliformes, que pueden, en consecuencia, ser recuperadas en la etapa inicial del análisis. No obstante la técnica ha demostrado su efectividad en la práctica. El número de organismos se establece mediante la cuenta de unidades formadoras de colonias (NOM-092-SSA1-1994. Determinación de Bacterias Coliformes. Técnica de Cuenta en Placa) o el uso de la técnica del número más probable. Esta última, también llamada técnica de dilución en tubo, proporciona una estimación estadística de la densidad microbiana presente con base a que la probabilidad de obtener tubos con crecimiento positivo disminuye conforme es menor el volumen de muestra inoculado. 1 OBJETIVO Y CAMPO DE APLICACION 1.1 Esta Norma Oficial Mexicana establece el método microbiológico para estimar el número de coliformes presentes en productos alimenticios, por medio del cálculo del número más probable (NMP) después de la incubación a 35 °C en un medio líquido. Este procedimiento puede aplicarse a agua potable, agua purificada, hielo y alimentos procesados térmicamente, así como a muestras destinadas a evaluar la eficiencia de prácticas sanitarias en la industria alimentaria. Este procedimiento debe seleccionarse cuando la densidad esperada es como mínimo de una bacteria en 10 ml de producto líquido y una bacteria por gramo de alimento sólido. Cuando la densidad bacteriana sea menor que la aquí citada y si la naturaleza del alimento lo permite, utilizar el método de filtrado en membrana. Si la densidad microbiana se espera sea mayor a 100 por mililitro o gramo de muestra, ampliar el intervalo de diluciones o utilizar el método en placa. 1.2 Campo de aplicación. Esta Norma Oficial Mexicana es de observancia obligatoria en el territorio nacional para las personas físicas o morales que requieran efectuar este método en productos nacionales y de importación. 2 FUNDAMENTO El método se basa en que las bacterias coliformes fermentan la lactosa incubadas a 35° C durante 24 a 48 horas, resultando una producción de gas y ácidos, los cuales viran el indicador de pH, dando un color característico en el medio líquido selectivo. 3 REFERENCIAS Esta Norma se complementa con lo siguiente: NOM-008-SCFI-1993    Norma Oficial Mexicana. Sistema General de Unidades de Medida. NOM-109-SSA1-1994   Procedimientos para la Toma, Manejo y Transporte de Muestras de Alimentos para su Análisis Microbiológico. * NOM-110-SSA1-1994   Preparación y Dilución de Muestras de Alimentos para su Análisis Microbiológico. * 4 DEFINICIONES Para fines de esta Norma se entiende por: Coliformes, bacterias que a 35 °C fermentan la lactosa con la producción de gas bajo las condiciones especificadas en esta Norma. * "Proyecto de Norma Oficial Mexicana en proceso de publicación". 5 SIMBOLOS Y ABREVIATURAS Cuando en esta Norma se haga referencia a las siguientes abreviaturas y símbolos se entiende por: g                                                                        gramo ml                                                                      mililitro l                                                                          litros mm                                                                   milímetro °C                                                                      grado Celsius %                                                                       por ciento pH                                                                     potencial de hidrógeno N                                                                        normal NMP                                                                  número más probable 6 REACTIVOS Y MATERIALES 6.1 Reactivos. 6.1.1 Soluciones diluyentes. 6.1.1.1 Solución reguladora de fosfatos (solución concentrada).                                                                  FORMULA Fosfato monopotásico                                                             34 g Agua                                                                                               1,0 l Preparación: Disolver el fosfato en 500 ml de agua y ajustar el pH a 7,2 con solución de hidróxido de sodio 1N. Aforar con agua a un litro. Esterilizar durante 15 minutos a 121 °C. Conservar en refrigeración (solución concentrada). Tomar 1,25 ml de la solución concentrada y llevar a un litro con agua. Distribuir en porciones de 99, 90 y 9 ml según se requiera. Esterilizar a 121 °C durante 15 minutos. Después de la esterilización, el pH y los volúmenes finales de la solución de trabajo deberán ser iguales a los iniciales. 6.1.1.2 Agua peptonada.                                                                  FORMULA Peptona                                                                                         1,0 g Cloruro de sodio                                                                          8,5 g Agua                                                                                               1,0 l Preparación: Disolver los componentes en un litro de agua. Ajustar el pH a 7,0 con hidróxido de sodio 1 N. Distribuir en porciones de 99, 90 y 9 ml o en cualquier volumen múltiplo de nueve según se requiera. Esterilizar a 121 °C durante 15 minutos. Después de la esterilización los volúmenes finales de la solución de trabajo deberán ser iguales a los iniciales. Si este diluyente no es usado inmediatamente, almacenar en lugar obscuro a una temperatura entre 0 a 5°C por un tiempo no mayor de un mes, en condiciones tales que no alteren su volumen o composición. 6.1.2 Medios de cultivo. Caldo lactosado (medio de enriquecimiento para agua potable y hielo). Caldo lauril sulfato triptosa (medio de enriquecimiento selectivo). Caldo lactosa bilis verde brillante (medio de confirmación). En el caso del análisis de agua potable y hielo puede utilizarse caldo lactosado o caldo lauril sulfato triptosa con púrpura de bromocresol (concentración 0.01 g/l de medio), como alternativa al uso de campanas de fermentación. Los tubos positivos se manifiestan por el vire del indicador a color amarillo. 6.1.2.1 Caldo lactosado. CUADRO 1 Ingrediente                                                         Medio                            Medio de                                               concentración                   concentración                                                                   1,5                               sencilla Extracto de carne                                                         4,5 g                                        3 g Peptona de gelatina                                                    7,5 g                                        5 g Lactosa                                                                         7,5 g                                        5 g Agua destilada                                                     1000 ml                                 1000 ml   Disolver los ingredientes en 1 litro de agua. Ajustar el pH final de tal manera que después de la esterilización éste sea de 6,9 ± 0,2 a 25°C. Distribuir en volúmenes de 10 ml en tubos con dimensiones de 16 x 160 mm el medio de concentración sencilla y de 20 ml en tubos de 20 x 200 mm el medio de concentración 1,5, cada tubo deberá tener campana de fermentación. Esterilizar en autoclave a 121 °C por 15 minutos. Enfriar rápidamente para evitar una exposición excesiva al calor. El aspecto del caldo es claro y de color beige. Se puede utilizar una concentración doble del medio de cultivo, en cuyo caso se emplearán 10 ml del caldo preparado, cuando se agreguen 10 ml de la muestra. 6.1.2.2 Caldo lauril sulfato triptosa. CUADRO 2 Ingrediente                                          Medio                            Medio de                                               concentración                   concentración                                                                1,5                                   sencilla Triptosa                                                     30           g                        20        g Lactosa                                                      7,5        g                          5         g                Fosfato dipotásico                (K 2 HPO 4 )                                                    4,125   g                          2,75    g                Fosfato monopotásico                KH 2 PO 4 )                                                      4,125   g                          2,75    g Cloruro de sodio                                       7,5        g                          5         g Lauril sulfato de sodio                             0,15      g                          0,1      g Agua destilada                                         1000         ml                  1000         ml   Disolver los componentes o el medio completo deshidratado calentando si es necesario. Ajustar el pH de tal manera que después de la esterilización éste sea de 6,8 a 25 °C. Distribuir en volúmenes de 10 ml en tubos con dimensiones de 16 x 160 mm el medio de concentración sencilla y de 20 ml en tubos de 20 x 200 mm el medio de concentración 1,5, cada tubo deberá tener campana de fermentación. Esterilizar en autoclave a 121 °C por 15 minutos. Las campanas de fermentación no deben de contener burbujas de aire después de la esterilización. Se puede utilizar una concentración doble del medio de cultivo, en cuyo caso se emplearán 10 ml de caldo preparado, cuando se agreguen 10 ml de muestra. 6.1.2.3 Caldo lactosa bilis verde brillante. Composición Peptona                                                                                       10 g Lactosa                                                                                       10 g Sales biliares                                                                             20 g Verde brillante                                                                              0,0133 g Agua                                                                                               1,0 l Disolver los componentes o el medio completo deshidratado en agua, calentar si es necesario. Ajustar el pH, de tal manera que después de la esterilización éste sea de 7,2 a 25 °C. Distribuir el medio en cantidades de 10 ml en tubos de 16 X 160 mm conteniendo campana de fermentación. Esterilizar en autoclave a 121 °C por 15 minutos. Las campanas de fermentación no deben contener burbujas de aire después de la esterilización. 6.2 Materiales. Pipetas bacteriológicas para distribuir 10 y 1 ml (o si es necesario de 11 y 2 ml), con tapón de algodón. Las pipetas pueden ser graduadas en volúmenes iguales a una décima de su volumen total. Frascos de vidrio de 250 ml con tapón de rosca. Utensilios esterilizables para la obtención de muestras: cuchillos, pinzas, tijeras, cucharas, espátulas, etc. Tubos de cultivo 20 x 200 mm y de 16 x 160 mm con tapones metálicos o de rosca. Campanas de fermentación (tubos de Durham). Pipetas bacteriológicas graduadas de 10 y 1 ml. Gradillas. Asa de platino o nicromel de aproximadamente 3 mm de diámetro Todo el material que tenga contacto con las muestras bajo estudio deberá esterilizarse mediante: Horno, durante 2 horas a 170 a 175 °C. Autoclave, durante 15 minutos como mínimo a 121 ± 1 °C. El material de vidrio puede sustituirse por material desechable que cumpla con las especificaciones deseadas. No debe usarse material de vidrio dañado por las esterilizaciones repetidas y éste debe ser químicamente inerte. 7 APARATOS E INSTRUMENTOS Horno para esterilizar que alcance una temperatura mínima de 170°C. Incubadora con termostato que evite variaciones mayores de ± 1,0 °C, provista con termómetro calibrado. Termómetro de máximas y mínimas. Autoclave que alcance una temperatura mínima de 121°C. Potenciómetro con una escala mínima de 0,1 unidades de pH a 25 °C. 8 PREPARACION DE LA MUESTRA Las muestras deben prepararse y diluirse, siempre que sea posible, de acuerdo a la NOM-110-SSA1-1994. Preparación y Dilución de Muestras de Alimentos para su Análisis Microbiológico. 9 PROCEDIMIENTO 9.1 Para agua potable y hielo. 9.1.1 Prueba presuntiva. 9.1.1.1 Inoculación. Agitar la muestra. Transferir volúmenes de 10 ml de muestra a cada uno de 5 tubos con 20 ml de caldo lactosado de mayor concentración y 1,0 ml y 0,1 ml de muestra a cada uno de los tubos de las series de 5 respectivamente con 10 ml de caldo lactosado de concentración sencilla. 9.1.1.2 Incubación. Incubar los tubos a 35°C. Examinar a las 24 ± 2 horas y observar si hay formación de gas, en caso contrario prolongar la incubación hasta 48 ± 2 horas. 9.1.2 Prueba confirmativa. De cada tubo que muestre formación de gas, tomar una asada y sembrar en un número igual de tubos con medio de confirmación. Incubar a 35 ± 0,5°C por 24 ± 2 horas o si la formación de gas no se observa en este tiempo, incubar por 48 ± 2 horas. En esta Norma Oficial Mexicana, para el analísis de agua potable, agua purificada y hielo, se emplea la serie de 5 tubos inoculados, 5 tubos con 10 ml, 5 tubos con 1 ml y 5 tubos con 0,1 ml, veáse el cuadro 4. 9.2 Para alimentos. Preparar suficiente número de diluciones para asegurar que todos los tubos correspondientes a la última dilución rindan un resultado negativo. 9.2.1 Prueba presuntiva. 9.2.1.1 Inoculación. Tomar tres tubos de medio de enriquecimiento de mayor concentración. Usar una pipeta estéril para tranferir a cada tubo 10 ml de la muestra si es líquida o 10 ml de la dilución primaria inicial, en el caso de otros productos. 9.2.1.1.1 Tomar tres tubos de concentración sencilla del medio selectivo de enriquecimiento. Usar una pipeta estéril para transferir a cada uno de estos tubos 1 ml de la muestra si es líquida o 1 ml de la dilución primaria en el caso de otros productos. 9.2.1.1.2 Para las diluciones subsecuentes, continuar como se indica en el párrafo anterior, usando una pipeta diferente para cada dilución. Mezclar suavemente el inóculo con el medio. 9.2.1.2 Incubación. Incubar los tubos a 35 ± 0,5 °C por 24 ± 2 horas y observar si hay formación de gas, en caso contrario prolongar la incubación hasta 48 ± 2 horas 9.2.2 Prueba confirmativa. De cada tubo que muestre formación de gas, tomar una asada y sembrar en un número igual de tubos con medio de confirmación. Incubar a 35 ± 0,5 °C por 24 ± 2 horas o si la formación de gas no se observa en este tiempo, prolongar la incubación por 48 ± 2 horas. En esta Norma Oficial Mexicana se considera una combinación de tres tubos por cada dilución de la serie. Para algunos productos y siempre que se requiera una mayor precisión en los resultados, será necesario inocular una serie de cinco o diez tubos. 10 EXPRESION DE LOS RESULTADOS Tomar la serie de tubos de la prueba confirmativa que dé formación de gas después del periodo de incubación requerido y buscar el NMP en los cuadros correspondientes. El cuadro 3 muestra algunos ejemplos que se pueden presentar. Ejemplos: Ejemplo 1. Cuando sólo una dilución muestra tres tubos positivos, elegir ésta y las diluciones mayores posteriores. Ejemplo 2. Cuando más de una dilución muestra tres tubos positivos y la última da menos de tres, elegir esta última y las dos diluciones anteriores más bajas. Ejemplo 3. Cuando en ninguna dilución hay tres tubos positivos y éstos se encuentran en más de tres diluciones, seleccionar las dos diluciones mayores positivas y la siguiente. Ejemplos 4 y 5. Cuando los tubos positivos sólo se encuentran en la muestra sin diluir y en la primera dilución seleccionar las tres primeras diluciones para el cálculo del número más probable. En cada caso se obtiene un número de tres cifras, lo cual es representado en los cuadros 4 al 7, según corresponda. En la columna que indica el número de tubos positivos se busca el índice del NMP. La técnica de NMP puede admitir gran cantidad de variaciones. Los resultados obtenidos con esta técnica deben ser utilizados con precaución. Los límites de confianza están representados en los cuadros 4 al 7. Por ejemplo, para una muestra sólida con un NMP de 70 coliformes por gramo, los límites de confianza en el 95% de los casos variarán de 10 a 230 coliformes por gramo (ejemplo 3 del cuadro 3) y en un producto con 24 de NMP de coliformes por gramo, los límites de confianza son de 3,6 a 130 coliformes por gramo (ejemplo 2 cuadro 3).   CUADRO 3 - Ejemplos de la selección de resultados positivos para el cálculo del NMP.   Ver imagen (dar doble click con el ratón)   a ____________, combinación seleccionada. b Cálculo del NMP para tres tubos. * Número de cuadro de consulta para el cálculo del índice del NMP. Cuadro 4. Indice del NMP y límites de confianza 95% para varias combinaciones de resultados positivos cuando son usados varios números de tubos (Diluciones 10, 1,0 y 0,1 g)ª   Ver imagen (dar doble click con el ratón) Ver imagen (dar doble click con el ratón) Ver imagen (dar doble click con el ratón)   Cuadro 5. Indice del NMP y límites de confianza 95% para varias combinaciones de resultados positivos cuando son usados varios números de tubos (Diluciones 1,0, 0,1 y 0,01 g)ª   Ver imagen (dar doble click con el ratón) Ver imagen (dar doble click con el ratón) Ver imagen (dar doble click con el ratón)   CUADRO 6. Indice del NMP y límites de confianza 95% para varias combinaciones de resultados positivos cuando son usados varios números de tubos (Diluciones 0,1, 0,01 y 0,001 g)ª   Ver imagen (dar doble click con el ratón) Ver imagen (dar doble click con el ratón) Ver imagen (dar doble click con el ratón)   Cuadro 7. Indice del NMP y límites de confianza 95% para varias combinaciones de resultados positivos cuando son usados varios números de tubos. (Diluciones 0,01, 0,001 y 0,0001 g)ª   Ver imagen (dar doble click con el ratón) Ver imagen (dar doble click con el ratón) Ver imagen (dar doble click con el ratón)   11 INFORME DE LA PRUEBA Informar "Número más probable (NMP) de coliformes por gramo o mililitro de muestra". En caso de muestras de agua informar NMP/100 ml. 12 OBSERVANCIA DE LA NORMA La vigilancia del cumplimiento de la presente Norma corresponde a la Secretaría de Salud. 13 CONCORDANCIA CON NORMAS INTERNACIONALES Esta Norma no tiene concordancia con normas internacionales. 14 BIBLIOGRAFIA 14.1 Bacteriological Analytical Manual. 1984. Food and Drugs Administration FDA. Bureau of Foods. Division of Microbiology. 6a Ed. Washington, D.C. 14.2 Norma ISO 4831 2a. 1991. Microbiology - General guidance for the enumeration of coliforms - Most probable number technique. International Organization for Standardization. 14.3 NORMA-Z-013/02. 1981. Guía para la Redacción, Estructuración y Presentación de las Normas Oficiales Mexicanas. Secretaría de Comercio y Fomento Industrial. 14.4 Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater. 1989. American Public Health Association. APHA-WWA-WPCF. 17° Ed. Washington D.C. 14.5 Vanderzant F., Carland S. y Don F. 1992. Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods. American Public Health Association. Washington, D.C. ## RESPUESTA a los comentarios respecto del Proyecto de Norma Oficial Mexicana NOM-112-SSA1-1994, Bienes y servicios. Determinación de bacterias coliformes. Técnica del número más probable. Tipo de publicación: respuestas Relación con la ficha: historial Fuente del documento: https://sidof.segob.gob.mx/notas/docFuente/4869374 [Documento con formato](/normas/nom-112-ssa1-1994/documentos/dof-4869374/) Texto derivado para búsqueda; consultar el documento con formato para tablas e imágenes.     Al margen un sello con el Escudo Nacional, que dice: Estados Unidos Mexicanos.- Secretaría de Salud. RESPUESTA A LOS COMENTARIOS RESPECTO DEL PROYECTO DE NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-112-SSA1-1994. BIENES Y SERVICIOS. DETERMINACION DE BACTERIAS COLIFORMES. TECNICA DEL NUMERO MAS PROBABLE. Publicado en el Diario Oficial de la Federación del 15 de agosto de 1994. La Dirección General de Control Sanitario de Bienes y Servicios, por acuerdo del Comité Consultivo Nacional de Normalización de Regulación y Fomento Sanitario; con fundamento en los artículos 39 de la Ley Orgánica de la Administración Pública Federal; 1o., 47 fracción III de la Ley Federal sobre Metrología y Normalización y 13 fracción I del Reglamento Interior de la Secretaría de Salud, ordena la publicación de las respuestas a los comentarios recibidos al proyecto de Norma Oficial Mexicana NOM-112-SSA1-1994. BIENES Y SERVICIOS. DETERMINACION DE BACTERIAS COLIFORMES. TECNICA DEL NUMERO MAS PROBABLE. PROMOVENTE                                                       RESPUESTA Cía. Nestlé,S.A. de C.V.                                         En el punto 2 referente al fundamento no se acepta abrir el rango de temperatura de incubación en virtud de que este grupo de bacterias fermentan la lactosa a 35°C ± 1°C.                                                               En el punto 9.1.1.1 referente al procedimiento se acepta señalar el uso del caldo lauril sulfato triptosa con púrpura de bromocresol ya que este medio de cultivo se puede utilizar para el análisis de agua potable y hielo tal como se señala en 6.1.2.                                                               En el punto 9.2.2 relativo al procedimiento no se acepta la ampliación del texto ya que resulta confuso. Comité de la Industria de Alimentos. SINALP                                                                     En el punto referente a Introducción, se acepta considerar la observación con respecto a la corrección del señalamiento de la NOM-113-SSA1-1994. Método para la cuenta de microorganismos coliformes totales en placa lo cual se tomará en cuenta en dicho apartado.                                                               En el apartado 6 correspondiente a reactivos y materiales, se acepta incluir al inicio de este apartado que los reactivos utilizados deben ser grado analítico y las características del agua a emplear.                                                               En el punto 6.1.2.1. y 6.1.2.2 de reactivos se acepta la adición al texto de que se puede utilizar el medio completo deshidratado y se incluye la consideración del volumen de agua para su disolución. No se acepta la propuesta de cambio de redacción, ya que la existente es clara y comprensible.                                                               En el 6.1.2.3 de reactivos no se acepta la propuesta de incluir que el medio de caldo-lactosa bilis verde brillante es de confirmación, ya que esta característica se encuentra señalada en el punto 6.1.2.                                                               En el punto 9.1.2 relativo al procedimiento, se acepta la propuesta de modificación en la redacción.                                                               En el apartado 10, referente a la expresión de los resultados, no se acepta la propuesta en la redacción, ya que la original es suficientemente explícita. Microbiología Industrial y Clínica, S.A. de C.V.                                                              En el punto referente a introducción no se acepta lo propuesto, ya que es una definición.                                                               En el punto 1.1 y 6.1.2, así como en el apartado 2, 9 y 10 no se acepta la inclusión del método de "ausencia o presencia", debido a que este grupo de microorganismos debe cuantificarse en los alimentos y bebidas por la manipulación de la que son objeto, el método propuesto es más razonable para coliformes fecales. Adicionalmente en lo referente a fundamento se acepta aclarar la observación de que el método se basa en la formación de gas como resultado de la fermentación de azúcares por estas bacterias.                                                               En el apartado 8 referente a la preparación de la muestra, no se acepta hacer referencia sobre el tratamiento con tiosulfato de sodio previo al muestreo de agua, ya que esta observación se contempla en la NOM-109-SSA1-1994, procedimientos para la toma, manejo y transporte de alimentos para su análisis microbiológico. Asimismo, no procedería la inclusión de este reactivo en el punto 6.1. Subdirección General de Abastecimiento. IMSS                                           En el apartado de Introducción no se acepta la eliminación de la primera parte, ya que ésta se refiere a las características básicas de este tipo de bacterias.                                                               En el apartado 1 relativo a objetivo y campo de aplicación no se aceptan las propuestas de modificación, en el 1.1 correspondiente al objetivo, se trata de que la Norma oriente sobre cuándo y en qué tipo de productos es aplicable. Y por lo que respecta al campo de aplicación no se puede modificar por ser una redacción de estructura de la Norma.                                                               En el apartado 2 relativo a fundamento no se acepta incluir que el gas formado se acumula en las campanas de fermentación, ya que esto se considera en el procedimiento.                                                               En los apartados 2 y 6, no se aceptan las unidades en K, ya que de acuerdo a la NOM-008-SCFI-1993. Sistema General de Unidades de Medida, establece que para expresar temperaturas convencionales se utilice °C.                                                               En el apartado 4 relativo a definiciones se acepta la propuesta a la ampliación al concepto de coliformes.                                                               En el punto 6 relativo a materiales y reactivos no se acepta cambiar la coma de separación de unidades por punto, de acuerdo a lo señalado en la NOM-008-SCFI-1993. Sistema General de Unidades de Medida.                                                               En el punto 6.1.2 relativo a los medios de cultivo, se acepta incluir el texto sugerido cuando se puedan utilizar medios de cultivo deshidratados.                                                               En el punto 6.1.2.1, relativo a reactivos, no se acepta cambio en la redacción original ya que es explícita. El rango de tolerancias de pH a ± 0,2 se encuentra establecido en la Norma.                                                               En el punto 6.1.2.2 se acepta la observación de que no es recomendable almacenar el medio de cultivo una vez preparado.                                                               La tabla propuesta en este punto no es relevante por lo que no se acepta.                                                               En el punto 6.1.2.3, no se acepta la propuesta debido a que esta técnica está validada con el volumen establecido en esta Norma.                                                               En el apartado 7 de aparatos e instrumentos se acepta considerar las observaciones que se contemplaron en la NOM-113-SSA1-1994, Método para la cuenta de microorganismos coliformes en placa.                                                               En el apartado 8 y 9 relativo a la preparación de la muestra y procedimiento, respectivamente, no se acepta incluir lo de la selección del esquema de diluciones porque ya se contempla este criterio en la NOM-110-SSA1-1994. Preparación y dilución de muestras para su análisis microbiológico.                                                               En el apartado 9 relativo a procedimiento no se acepta mencionar las condiciones de muestreo, ya que los procedimientos se señalan en la Norma correspondiente, asimismo se aclara que la Norma es aplicable tanto para productos sólidos como para líquidos. NORMEX                                                                  En el apartado relativo a Introducción se aceptan parcialmente cambios propuestos en la redacción para mejor comprensión. Y se corrige la referencia a la NOM-113-SSA1-1994.                                                               En el apartado 1 relativo al Objetivo y Campo de Aplicación se acepta el cambio en la redacción.                                                               En el apartado 3 relativo a referencias desaparece el texto: "proyecto de norma en proceso de publicación" que aparece a pie de página en el documento en cuestión.                                                               En el apartado 7 relativo a aparatos e instrumentos se acepta ampliar el rango de temperatura del baño del agua a ± 1°C.                                                               En el apartado 9 relativo a procedimiento se aceptan los cambios en redacción para mejor comprensión del documento. Sabritas, S.A. Pepsico de México, S.A de C.V. Grupo GAMESA Asociación Nacional de Fabricantes de Galletas y Pastas Alimenticias, A.C. y Pastas Alimenticias, A.C.                                   En el apartado referente a la Introducción no se acepta la propuesta de cambio en la redacción, ya que la relevancia se menciona en donde se aplica el método. Sabritas, S.A. Pepsico de México, S.A de C.V. Grupo GAMESA Asociación Nacional de Fabricantes de Galletas y Pastas Alimenticias, A.C. Comité de la Industria de Alimentos. SINALP                                                               En el apartado referente al Objetivo y Campo de Aplicación no se acepta la propuesta, ya que el objetivo orienta además, sobre, cuándo y en qué tipo de productos es aplicable.                                                               En el punto 1.2 se acepta incluir la frase "para fines oficiales".                                                               En el apartado 6 se acepta incluir dos columnas con los títulos de ingredientes y cantidades, señalándose el nombre químico de cada uno de ellos, la cantidad utilizada, respectivamente, y se homogeneizará el número de decimales en las cantidades.                                                               En el punto 6.1 referente a reactivos se acepta ampliar el rango de tolerancia de ± 1°C a la temperatura de esterilización en autoclave.                                                               En el punto 6.1 referente a reactivos se acepta la tolerancia en el pH del medio de ± 0,1 o ± 0,2 cuando proceda.                                                               En el punto 6.1.2.1 relativo a reactivos no se acepta el cambio en la redacción, ya que el documento original es entendible.                                                               En el punto 6.2 se acepta como alternativa de esterilización en horno 180° C por 1 hora. Se acepta incluir la conjunción "o" para la esterilización según sea el caso. Asociación Nacional de Fabricantes de Galletas y Pastas Alimenticias, A.C.             En el punto 6.1.2.1, no se acepta la observación en virtud de que sí se contemplan las condiciones de esterilización en el medio del cultivo.                                                               En el apartado 10 relativo a expresión de los resultados, no se acepta cambio en la redacción, ya que sí es entendible. Comité de la Industria de Alimentos. SINALP                                                                     En el apartado 6 de reactivos y materiales se sustituye el texto "aforar a" por "llevar a". Asimismo, no se acepta utilizar el término "aproximadamente" en las soluciones normales, ya que el concepto queda muy abierto. Asimismo, la Dirección General de Control Sanitario de Bienes y Servicios consideró necesario incluir modificaciones indispensables para la comprensión de la Norma Oficial Mexicana como las siguientes: En el apartado 2 Fundamento, se modifica la redacción, ya que no existe la presencia de un indicador de pH. En el apartado de Referencias la NOM-008-SCFI-1993. Sistema General de Unidades de Medida, se traslada al apartado de Bibliografía, en virtud de que no es de complementación, únicamente es de consulta. Además se sustituye el texto "Proyecto de Norma Oficial Mexicana en proceso de publicación" por " Proyecto en proceso de expedición como Norma Oficial Mexicana". En el apartado de Bibliografía se adicionan y reordenan las citas bibliográficas. Reubicación del apartado de Observancia de la Norma e inclusión del apartado de Vigencia. Como resultado de las modificaciones anteriores se adecua el índice y la numeración. Cabe mencionar que todas las modificaciones realizadas son para mejor comprensión de la Norma Oficial Mexicana, respetándose el contenido tal y como fue concertada. Atentamente Sufragio Efectivo. No Reelección. México, D.F., a 20 de diciembre de 1994.- El Director General, José Meljem Moctezuma .- Rúbrica.